Instruções de montagem de slides
Antes de iniciar o processo de preparação de slides, verifique se você reuniu todos os materiais necessários, incluindo slides, tampas de tampa, droppers ou pipetas e quaisquer produtos químicos ou manchas que você pretende utilizar.
Existem dois tipos principais de slides com os quais você estará trabalhando:
1. A lâmina de vidro plano padrão.
2. A depressão ou o poço deslizam, que possui um pequeno poço ou recuo em seu centro, projetado para reter uma gota de água ou substância líquida. Normalmente, eles são mais caros e são comumente usados sem uma lampa de capa.
As lâminas padrão podem ser feitas de plástico ou vidro, medindo 1 x 3 polegadas (25 x 75 mm) de tamanho e 1 a 1,2 mm de espessura.
Para slides molhados, é essencial um lamine ou vidro de tampa. Este é um pedaço de vidro quadrado e ultrafino (ou plástico) que é cuidadosamente posicionado sobre a queda da amostra. Sem a cobertura, a tensão superficial faria com que a gota de uma forma de cúpula. A cobertura contraria essa tensão, garantindo que a amostra fique plana para um exame preciso com foco mínimo. Além disso, a cobertura atua como uma salvaguarda, impedindo que a lente objetiva interfira na queda da amostra.
Montagens de lâmina de microscópio
As montagens de microscópio referem -se aos métodos usados para proteger lâminas ou amostras de microscópio para observação. Existem principalmente quatro tipos:
1. Montagens de slide:Esse é o tipo mais comum e envolve a colocação de uma amostra em uma lâmina de vidro plano, geralmente usando um meio de montagem (como um líquido ou gel) para mantê -lo no lugar. Uma laminada é adicionada para proteger a amostra e fornecer uma superfície plana para visualização.
2. Cavidade ou poço suportes:Esses slides têm um pequeno poço ou depressão no centro, projetados para manter uma gota de líquido, como água ou um fluido de montagem especializado. Eles são usados ao trabalhar com espécimes que requerem imersão em um líquido.
3. Montagens temporárias:Essas montagens não são destinadas a armazenamento ou observação a longo prazo. Eles envolvem métodos simples e rápidos, como colocar uma amostra em um slide com uma gota de água. Eles são frequentemente usados para observar organismos vivos ou amostras sensíveis ao tempo.
4. Montagens permanentes:Estes são projetados para armazenamento e observação a longo prazo. Eles envolvem procedimentos mais complexos, incluindo o uso de meios de montagem especializados que endurecem ao longo do tempo, encapsulando a amostra em um meio transparente. Esse tipo de montagem é frequentemente usado para slides educacionais e pesquisa científica.
Cada tipo de montagem possui suas aplicações específicas e é escolhido com base na natureza da amostra e no objetivo da observação.
Quatro maneiras comuns de montar um slide de microscópio
Existem vários métodos comuns para montar uma lâmina de microscópio, dependendo do tipo de amostra e do objetivo da observação. Aqui estão quatro maneiras comuns de montar um slide de microscópio:
Montagem seca:
Procedimento: Neste método, uma amostra é colocada diretamente em uma lâmina de microscópio limpo e seco. É frequentemente usado para espécimes que não requerem umidade ou imersão adicional em um líquido.
APLICAÇÕES: A montagem seca é adequada para observar amostras sólidas, como peças de plantas, cabelos ou minerais.
Montagem úmida:
Procedimento: Uma pequena gota de líquido (geralmente água ou um fluido de montagem especializado) é colocado na lâmina e a amostra é então adicionada a essa queda. Uma laminada é suavemente colocada sobre a amostra para evitar a secagem e distorção.
APLICAÇÕES: As montagens úmidas são usadas para observar organismos, células ou espécimes que requerem imersão em um líquido.
Montagem de abóbora:
Procedimento: Esta técnica envolve a colocação de uma amostra em um slide e, em seguida, pressioná -lo suavemente com um lamine de capa ou outro deslizamento para achatá -lo. Isso é comumente usado para tecidos moles ou partes delicadas da planta para criar uma camada fina e transparente para observação.
APLICAÇÕES: As montagens de abóbora são usadas para examinar os tecidos, especialmente na biologia vegetal.
Montagem de esfregaço:
Procedimento: Uma pequena quantidade da amostra (geralmente uma substância líquida ou semi-líquido) é espalhada fina e uniformemente por uma lâmina, frequentemente usando a borda de outra lâmina. Em seguida, é permitido secar ao ar ou pode ser fixado com um agente químico.
APLICAÇÕES: As montagens de esfregaço são comumente usadas para observar microorganismos como bactérias ou para preparar manchas de sangue para microscopia.
Esses métodos atendem a diferentes tipos de amostras e seus requisitos específicos para observação. A escolha da técnica de montagem depende de fatores como a natureza da amostra, o objetivo da observação e o nível desejado de detalhes e clareza.
Manchas de microscópio
As manchas de microscópio, também conhecidas como manchas ou corantes biológicas, são substâncias usadas na microscopia para melhorar o contraste e a visibilidade das amostras biológicas. Eles trabalham se ligando seletivamente a componentes celulares específicos, como proteínas, ácidos nucleicos ou lipídios, o que permite uma visualização e diferenciação mais fáceis de estruturas celulares. Aqui estão alguns tipos comuns de manchas de microscópio:
1. Hematoxilina e eosina (H&E):
Tipo: mancha combinada.
Uso: Uma das manchas mais amplamente utilizadas na histologia, a hematoxilina mancha o núcleo celular azul-roxo, enquanto a eosina mancha o citoplasma e algumas estruturas extracelulares rosa.
2. Blue de metileno:
Tipo: corante básico.
Uso: manchas de núcleos celulares azul. É comumente usado para estudos gerais de citologia e microbiologia.
3. Giemsa:
Tipo: mancha combinada.
Uso: Usado para coloração de células sanguíneas, diferencia componentes nucleares e citoplasmáticos em uma variedade de cores, permitindo a identificação de vários tipos de células.
4. Mancha de grama:
Tipo: mancha combinada.
Uso: distingue entre duas categorias principais de bactérias: Gram-positivo (que retêm a mancha violeta de cristal) e Gram-negativo (que assumem a contra-estima safranina).
5. mancha de Wright:
Tipo: mancha combinada.
Uso: usado principalmente para esfregaços no sangue, essa mancha permite a diferenciação de tipos de células sanguíneas e identificação de anormalidades.
6. Iodo de Lugol:
Tipo: mancha à base de iodo.
Uso: usado em conjunto com o iodo de Gram, ele pode ser usado para melhorar o contraste de certas estruturas celulares.
7. Óleo vermelho O:
Tipo: corante lipofílico.
Uso: liga -se especificamente aos lipídios, tornando -o útil para coloração de estruturas como gotículas de gordura nas células.
8. Schiff de ácido periódico (PAS):
Tipo: mancha baseada em reação química.
Uso: reage com carboidratos, destacando estruturas como glicogênio, mucinas e outras glicoproteínas.
9. Toluidina azul:
Tipo: corante básico.
Uso: mancha componentes ácidos em células e tecidos, incluindo grânulos de mastócitos e ácidos nucleicos.
10. Safranin:
Tipo: corante básico.
Uso: Usado como uma contra-alveração na coloração de Gram para colorir bactérias gram-negativas.
Estes são apenas alguns exemplos, e existem muitas outras manchas especializadas usadas para fins específicos em microscopia, como manchas especiais para tecidos conjuntivos, fibras nervosas ou estruturas celulares específicas. A escolha da mancha depende do tipo de amostra e das informações necessárias do exame microscópico.
Etapas de coloração do microscópio
1. Comece preparando uma lâmina de montagem úmida, posicionando a amostra em uma lâmina de microscópio limpo.
2. Usando um conta -gotas ou pipeta, junte cuidadosamente uma gota da mancha escolhida.
3. Coloque essa gota de mancha na borda externa do lamine da capa, garantindo que ela entre em contato com a borda do slide.
4. Para facilitar a distribuição uniforme da mancha, posicione um pedaço de guardanapo ou toalha de papel ao longo do lado oposto da laminação, pressionando -o firmemente contra a borda.
5. Se necessário, aplique uma queda de mancha adicional para garantir a cobertura completa da sua amostra.
6. Seu slide agora está totalmente preparado para observação sob o microscópio.
